QTYPE son ensayos de PCR-Tiempo Real en formato multiplex y con sondas de hidrólisis destinados a la determinación de los alelos HLA-A, B, C, DRB1, DRB3, DRB4, DRB5, DQA1, DQB1, DPA1 y/o DPB1 con baja resolución de forma rápida y robusta, partiendo de cantidades bajas de ADN genómico humano, eliminando el riesgo de malinterpretación por dímeros de primers y otros artefactos derivados de las técnicas de PCR en Tiempo Real con colorantes intercalantes.
Por su diseño de secuencia específica (SSP), las sondas de hidrólisis contribuyen también al aumento de la especificidad del ensayo, disminuyendo potencialmente el número de ambigüedades en los resultados finales.
Cada posición de la placa QTYPE que cuenta con 384 pocillos, contiene los primers predispensados y liofilizados que se unirán a un grupo concreto de alelos HLA para su amplificación, así como las sondas de hidrólisis dirigidas a la unión en el espacio entre primers. El kit lleva una MasterMix que ya incluye la enzima Taq Polimerasa.
Para llegar a las determinaciones de amplificación positiva o negativa, QTYPE utiliza tres canales de detección de fluorescencia: uno para detectar un control interno de amplificación (de una región conservada del genoma humano) para asegurar que se ha añadido ADN en el pocillo así como dos canales para reacciones HLA específicas. El diseño de los ensayos permite la lectura hasta en 4 colores, aumentando así considerablemente las posibles combinaciones para la detección de nuevos alelos futuros a incluir.
Se trata de ensayos rápidos, robustos y precisos que permiten obtención de resultados de forma directa y fácilmente interpretable, validados en aparatos Tiempo Real LightCycler 480 II (Roche) y Quantstudio™ 6/7 y ViiA™-7 (Thermo Fisher).
